MAP4K4在膀胱癌中的表达及对膀胱癌细胞株T24生物学行为的影响

作者： 马宝杰 ; 李海波 ; 张昌文 ; 蔡启亮 ; 李刚 ; 徐勇

摘要：目的 探讨丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4（MAP4K4）对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭和凋亡的影响. 方法 采用基因芯片技术对2010年6月至201 1年6月5对肌层浸润性膀胱癌及癌旁组织的基因表达谱进行初步研究,对比癌和癌旁组织的差异基因表达,筛选与膀胱癌发生、发展相关基因.结合文献检索,筛选出 MAP4K4作为研究基因,并采用PCR和蛋白质印迹法从转录和翻译水平检测16对肌层浸润性膀胱癌及癌旁组织中MAP4K4的表达情况,验证基因芯片的结果.然后设计一个空载体质粒（对照组）及MAP4K4靶向短发夹RNA （shRNA）核苷酸序列质粒（靶向干扰组）分别转染T24细胞,嘌呤霉素筛选稳定转染细胞,qRT-PCR和蛋白质印迹法检测靶基因干扰效率,并对转染后T24细胞进行MTT细胞增殖实验、Transwell细胞侵袭实验及Annexin-V法细胞凋亡检测. 结果 膀胱癌组织中MAP4K4表达高于癌旁组织（P=0.020）.MAP4K4基因沉默后细胞增殖减慢（靶向干扰组与对照组,P＜0.001）.靶向干扰组与对照组穿膜细胞分别为5.40±2.07和17.00±2.74（P=0.004）,细胞凋亡比例分别为（15.72±6.40）％和（4.23±3.29）％（P=0.023）,组间比较差异均有统计学意义. 结论 MAP4K4在膀胱癌中相对于正常组织高表达,降低MAP4K4基因表达可以抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡.MAP4K4有望成为膀胱癌治疗的新靶点.

关键字： 丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4    膀胱肿瘤    基因沉默    寡核苷酸序列分析    Mitogen-activated    protein    kinase    kinase    kinase    kinase    4      

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