膀胱癌BIU-87细胞株导向肽NYZL1靶向性的实验研究

作者： 庞建智 [1,5] ; 闫三华 [2] ; 杨晓峰 [3] ; 苏西西 [1] ; 罗芳 [4] ; 李宏州 [1] ; 罗俊茜 [4] ; 张帆 [4] ; 张小雷 [1] ; 王东文 [3]

摘要：目的 验证导向肽NYZL1与膀胱癌BIU-87细胞株及其移植瘤结合的靶向特异性.方法 2014年4-12月固相合成导向肽NYZL1及阴性对照肽svNYZL1,采用异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）标记,制备实验组荧光分子探针FITC-氨基己酸-CSSPIGRHC（FITC-NYZL1）和对照组荧光分子探针FITC-氨基己酸-CRIGSPHSC（FITC-svNYZL1）.向膀胱癌BIU-87细胞株悬液中分别加入两种探针孵育,用流式细胞仪检测细胞平均荧光强度值,明确探针的亲和作用.将膀胱癌BIU-87细胞株爬片,分别加入两种探针孵育,用激光共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope,LSCM）观察探针与细胞结合的荧光图像,明确其亲和作用的特异性.选取16只SPF级BALB/c-nu雄性裸鼠.3～4周龄.体质量15 ～ 18 g.成功构建膀胱癌BIU-87细胞荷瘤裸鼠模型.采用完全随机分组法分为2组,每组8只,经尾静脉分别注入两种探针.4h后,实验组和对照组各取5只,剖取肿瘤组织、心、肝、脾、肺、肾、膀胱和胆囊,光学分子成像系统观察肿瘤及各组织的荧光图像;24 h后,实验组和对照组各取3只荷瘤裸鼠,剖取肿瘤组织、心、肝、脾、肺、肾和膀胱,制作冷冻切片,LSCM下观察肿瘤及各组织的荧光图像.结果 流式细胞仪检查实验组和对照组的平均荧光强度值分别为50.34±3.63和17.72±1.57,差异有统计学意义（P＜0.05）.LSCM观察实验组细胞可见明显的绿色荧光,对照组细胞未见明显的绿色荧光.体内研究发现,光学分子成像系统观察肿瘤组织、胆囊及膀胱可见明显荧光,其余器官如心、肝、脾、肺和肾等未见明显荧光.LSCM观察下实验组的肿瘤组织中可见明显绿色荧光,而实验组其他器官（心、肝、脾、肺、肾和膀胱）和对照组肿瘤组织及器官中未见绿色荧光.结论 膀胱肿瘤导向肽NYZL1能够与膀胱癌BIU-87细胞株及其移植瘤靶向性结合,并可携带荧光素标记肿瘤组织.

关键字： 膀胱癌    肿瘤导向肽    光学分子影像    靶向性      

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